Zytogenetik- und FISH-Labor

Konventionelle Zytogenetik und FISH-Test

Mit den Methoden der konventionellen Zytogenetik und der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) werden die als Chromosomen bezeichneten Strukturen, in denen die genetische Information jeder Zelle verpackt und gespeichert ist, strukturell und numerisch untersucht (Karyotypisierung). Durch die Karyotypisierung werden chromosomale Veränderungen festgestellt, die vor allem bei hämatologischen Krebserkrankungen für Diagnose und Verlaufskontrolle entscheidend sind.

Wie wird der Test durchgeführt:
Knochenmarkproben werden 24 Stunden lang unter sterilen Bedingungen in einem Kulturmedium vermehrt, das ein gleichzeitiges Wachstum der Zellen ermöglicht (synchronisierte Kultur). Anschließend werden die gewonnenen Zellen auf einen Objektträger gebracht, und die zu untersuchenden Chromosomen werden in einem geeigneten Medium gealtert. Die gespreizten Chromosomen werden gefärbt (Giemsa-Trypsin-Bänderungsmethode) und für die mikroskopische Untersuchung vorbereitet. Die so vorbereiteten Proben werden im Bildanalysesystem strukturell und numerisch untersucht und karyotypisiert.

Bei der FISH-Methode wird ähnlich wie beim zytogenetischen Test mit Knochenmarkproben eine synchronisierte Kultur angelegt. Anschließend werden die Zellen geerntet, und es werden fluoreszenzmarkierte DNA-Fragmente (Sonden) aufgebracht, die den zu untersuchenden DNA-Bereich erkennen. Man wartet, bis sich die Sonden an die DNA gebunden haben, und entfernt nicht gebundene Fragmente durch Waschen. Die Zellkerne werden zusätzlich gefärbt (DAPI-Färbung) und im Bildanalysesystem untersucht. Zytogenetik- und FISH-Ergebnisse werden gemäß der aktuellen „Internationalen Nomenklatur der Humanzytogenetik“ berichtet.

Wichtige Hinweise zur Zytogenetik- und FISH-Analyse
Der Zytogenetik- und FISH-Test wird aus Knochenmarkproben durchgeführt. Unter sterilen Bedingungen in eine heparinisierte Spritze oder ein heparinisiertes Röhrchen (mit grünem Deckel) entnommene Proben müssen so schnell wie möglich nach der Entnahme in das Labor der Abteilung für Grundlagen der Onkologie gebracht werden, um den Verlust lebender Zellen zu minimieren. Außerdem ist es für den Erfolg des Tests wichtig, dass die entnommenen Knochenmarkproben keine Gerinnsel enthalten. Daher wird empfohlen, die Spritze nach der Entnahme ein- bis zweimal auf den Kopf zu drehen, damit sich die Probe gut mit dem Heparin vermischt. Andernfalls wird die Probe nicht angenommen.

Die Berichte zur konventionellen Zytogenetik sind innerhalb von 2 bis 3 Wochen, die FISH-Berichte innerhalb von 10 Tagen über das Krankenhaussystem beim Sekretariat der Abteilung, in der die Untersuchung stattfand, oder beim Sekretariat der Abteilung für Grundlagen der Onkologie erhältlich.