Лаборатория цитогенетики и FISH

Конвенциональная цитогенетика и тест FISH

Методами конвенциональной цитогенетики и флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) исследуются структурно и численно хромосомы — структуры, в которых упакована и хранится генетическая информация каждой клетки (кариотипирование). С помощью кариотипирования выявляются хромосомные нарушения, имеющие решающее значение для диагностики и наблюдения заболеваний, в первую очередь гематологических раковых заболеваний.

Как проводится тест:
Образцы костного мозга в стерильных условиях в течение 24 часов размножаются в культуральной среде, обеспечивающей одновременное деление клеток (синхронизированная культура). Затем собранные клетки наносятся на предметное стекло, и обеспечивается созревание исследуемых хромосом в подходящей среде. Расправившиеся и распределившиеся хромосомы окрашиваются (метод G-бэндинга Гимза-трипсин) и подготавливаются к микроскопическому исследованию. Подготовленные таким образом образцы исследуются в системе анализа изображений структурно и численно, и проводится кариотипирование.

В методе FISH, как и в цитогенетическом тесте, проводится синхронизированная культура с образцами костного мозга. После этого клетки собираются, и на них наносятся флуоресцентно меченые фрагменты ДНК (зонды), распознающие исследуемый участок ДНК. Ожидают связывания зондов с ДНК, а несвязавшиеся фрагменты удаляются промыванием. Ядра клеток также окрашиваются отдельно (краситель DAPI) и исследуются в системе анализа изображений. Результаты цитогенетики и FISH оформляются в соответствии с действующей «Международной системой цитогенетической номенклатуры человека».

На что следует обратить внимание при цитогенетическом анализе и анализе FISH
Цитогенетический тест и тест FISH проводятся на образцах костного мозга. Образцы, взятые в стерильных условиях в шприц с гепарином или в пробирку с гепарином (с зелёной крышкой), необходимо как можно скорее после взятия доставить в лабораторию кафедры фундаментальной онкологии, чтобы свести к минимуму потерю живых клеток. Кроме того, для успеха теста важно, чтобы взятые образцы костного мозга не содержали сгустков. Поэтому рекомендуется после взятия образца один-два раза перевернуть шприц вверх-вниз, чтобы образец хорошо смешался с гепарином. В противном случае образец не принимается.

Заключения по конвенциональной цитогенетике можно получить в течение 2-3 недель, а заключения по FISH в течение 10 дней через больничную систему в секретариате отделения, где проходил осмотр, или в секретариате кафедры фундаментальной онкологии.