Sitogenetik ve FISH Laboratuvarı

Konvansiyonel Sitogenetik ve FISH Testi

Konvansiyonel sitogenetik ve Floresan In Situ Hibridizasyon (FISH) yöntemleri ile her hücrenin genetik bilgilerinin paketlenerek saklandığı kromozom adı verilen yapılar, yapısal ve sayısal olarak incelenir (karyotiplendirme). Karyotiplendirme ile başta hematolojik kanserler olmak üzere, hastalık tanı ve takibinde belirleyici olan kromozomal bozukluklar belirlenmektedir.

Test nasıl yapılır:
Kemik iliği örnekleri 24 saat boyunca steril koşullarda hücrelerin eş zamanlı çoğalmasını sağlayacak kültür ortamında çoğaltılır (senkronize kültür). Daha sonra toplanan hücreler lam üzerine alınarak incelenecek kromozomların uygun ortamda yaşlanması sağlanır. Genişleyerek yayılan kromozomlar boyanır (Giemsa-Tripsin bantlama yöntemi) ve mikroskobik incelenmeye hazır hale getirilir. Bu şekilde hazırlanan örnekler görüntü analiz sisteminde yapısal ve sayısal olarak incelenir ve karyotiplendirme yapılır.

FISH yönteminde de sitogenetik testine benzer şekilde, kemik iliği örnekleri ile senkronize kültür yapılır. Bu işlemi takiben, hücreler toplanır ve üzerine incelenecek DNA bölgesini tanıyan floresan ile işaretlenmiş DNA parçacıkları (problar) uygulanır. Probların DNA’ya bağlanması için beklenir ve bağlanmayan parçacıklar yıkanarak uzaklaştırılır. Hücrelerin çekirdeği de ayrıca boyanarak (Dapi boyası) görüntü analiz sisteminde incelenir. Sitogenetik ve FISH sonuçları güncel “Uluslararası İnsan Sitogenetik Nomenklatürü”ne uygun şekilde raporlanır.

Sitogenetik ve FISH analizi için dikkat edilmesi gereken noktalar
Sitogenetik ve FISH testi kemik iliği örneklerinden çalışılmaktadır. Steril şartlarda heparinli enjektör veya heparinli tüp (yeşil kapaklı) içerisine alınmış örneklerin, canlı hücre kaybını en aza indirmek amacıyla alındıktan sonra en kısa sürede Temel Onkoloji Anabilim Dalı Laboratuvarına ulaştırılması gerekmektedir. Ayrıca, alınan kemik iliği örneklerinin pıhtı içermemesi testin başarısı için önemlidir. Bu nedenle örneğin alındıktan sonra heparinle iyice karışması için, enjektörün bir iki kez aşağı - yukarı çevrilmesi önerilir. Aksi takdirde örnek kabul edilmemektedir.

Konvansiyonel sitogenetik sonuç raporları 2-3 hafta içerisinde, FISH sonuç raporları ise 10 gün içerisinde muayene olunan bölüm sekreterliğinden hastane sistemi vasıtasıyla veya Temel Onkoloji Anabilim Dalı Sekreterliği’nden alınabilmektedir.